低温生物菌种公司-低温生物菌种-北京开碧源

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    2020-11-28

杨克敏
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低温生物菌种的孢子分离法

( 1 )褶上涂抹法:选取新鲜、健壮、未开伞、的子实体,洗净后用0 75 %酒精表面灭菌2 分钟,然后连同培养基一起放入接种箱内,经马林熏蒸消毒12 ~ 24 小时,再按无菌操作技术将接种环在子实体菌褶上涂抹,把涂抹后带孢子的接种环在培养基上划线接种,然后置于25 ~ 28 ℃恒温箱内培养,可得纯菌种。

( 2 )孢子印采集法:取灭过菌的载玻片、试纸或黑布,置于新鲜、未开伞或未开裂的子体菌褶的下方。经24 小时后,便落下孢子,形成印痕(即孢子印)。然后,用接种环或玻璃棒蘸取孢子,接种在平面或斜面培养基上,进行恒温培养,低温生物菌种,可得纯菌种。

( 3 )孢子收集器采集法:孢子收集器由玻璃钟罩、培养皿、三角架、搪瓷盘等组成。钟罩下为一搪瓷盘,直径25 厘米左右,盘内先垫衬4~6 层纱布,中央放1 副9 厘米直径的培养皿,大盖口朝下,上放小的,口向上。然后,在上面小的培养皿上放1 只铅丝绕成的三角架,再将带孔的玻璃钟罩盖上,顶上罩孔用棉塞塞好,用纱布包好整个孢子收集器,置于高压灭菌锅或蒸笼内灭菌2小时。




低温生物菌种退化的原因是什么?

退化(degeneration):菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某 些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象,称为菌种的退化。菌种退化不是突然发生的,而是从量变到---的逐步演变过程。开始时,在群体细胞中仅有个别细胞发生自发突变(一般均为负变),不会使群体菌株性能发生改变。经过连续传代,群体中的负变个体达到一定数量,发展成为优势群体,从而使整个群体表现为---的退。经分析发现,导致这一现象的原因有以下几方面。  

1. 基因突变:1.有关基因发生负突变导致菌种退化  菌种退化的主要原因是有关基因的负突变。如果控制产量的基因发生负突变,则表现为产量下降;如果控制孢子生成的基因发生负突变,则产生孢子的能力下降。菌种在移种传代过程中会发生自发突变。虽然自发突变的几率很低(一般为10-6~10-9),尤其是对于某一特定基因来说,突变频率---。但是由于微生物具有---的代谢繁殖能力,随着传代次数增加,退细胞的数目就会不断增加,在数量上逐渐---势,成为一株退化了的菌株。

2.表型---造成菌种退化  表型---现象也会造成菌种退化。如,在诱变育种过程中,经常会发现某菌株初筛时产量较高,进行复筛时产量却下降了。


低温生物菌种的滤纸保藏法

(1)将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条,装入0.6×8cm的安瓿管中,每管1-2张,塞以棉塞,1.05kg/cm2>;,121.3℃灭菌30分钟。

(2)将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。

(3)取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内,取数环菌苔在牛乳内混匀,制成浓悬液。

(4)用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内,使其吸饱,再放回至安瓿管中,低温生物菌种价格,塞上棉塞。

(5)将安瓿管放入内有二磷作吸水剂的干燥器中,用真空泵抽气至干。

(6)将棉花塞入管内,用火焰按图ⅶ-13熔封,保存于低温下。

(7)需要使用菌种,---培养时,可将安瓿管口在火焰上烧热,滴一滴冷水在烧热的部位,使玻璃破碎,低温生物菌种公司,再用镊子敲掉口端的玻璃,待安瓿管开启后,取出滤纸,放入液体培养基内,置温箱中培养。

---、酵母菌、丝状---均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状---甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便,不需要特殊设备。




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