湖北低温生物菌种-开碧源环境工程公司-低温生物菌种公司

分离筛选低温生物菌种的基本程序

流程

4.1 优良糖化酶菌株的分离与筛选

融化培养基***倒平板***打散孢子团粒***梯度稀释***涂布平板***培养观察***滴加碘液***挑菌落***接种***培养***糖化酶活力测定***菌种保存

4.2 酸乳制品中的乳酸菌的分离

制培养基***倒平板***梯度稀释***涂布平板***培养观察***挑菌落***接牛乳管***培养观察***传代培养***挑选凝乳管***乳酸测定***菌种保存

5 步骤

优良糖化酶菌株的分离与筛选

（1）融化淀粉察氏培养基，稍冷后倒平板与斜面数个。

（2）取种曲少许，加入10ml带玻璃球的无菌生理盐水的三角瓶中，用力振荡打散孢子团粒，使之形成均匀的孢子悬浮粒。然后将其用无菌纱布过滤于无菌试管中。

（3）将上述滤液以10倍稀释法知释至10-7，取后3个稀释度的稀释液各0.2ml，于淀粉察氏培养基平板上用无菌涂布器分别依次涂布2至3个皿，30℃培养1~2d。

（5）性能测定：测定各菌落的糖化酶活力。

菌种保藏的目的、原理及常用的方法有哪些？

微生物具有容易变异的特性，因此，湖北低温生物菌种，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。

低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。

保藏方法大致可分为以下几种：

1．传代培养保藏法

又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等（后者作保藏厌氧---用），培养后于4—6℃冰箱内保存。

2．液体石蜡覆盖保藏法

是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种存活率，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。

3．载体保藏法

是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。

4．寄主保藏法

用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，低温生物菌种，如---、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。---等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。

5．冷冻保藏法

可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速---（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法。

6．冷冻干燥保藏法

先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥）。