(一)培养基保存法
利用各种斜面和半固体培养基,加上石蜡油保存菌种,是一种简易的保存方法。
1.普通琼脂斜面保存法:肠道菌、等一般---可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉膏汤,以防干涸。经35℃培养18~24h后,移种于4℃冰箱中,一般可保存一个月,每月传代一次。
2.---琼脂斜面保存法:链球菌、应接种于---琼脂斜面上,35℃培养生长后,置4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,低温生物菌种报价,新分离菌株须2~4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。
3.巧克力色斜面保存法:宜保存菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移种一次。
4.鸡蛋斜面保存法:适于保存含有vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的---,一般可保存一个月。
5.半固体穿刺保存法:将---接种于琼脂半固体或琼脂半固体内,经35℃培养18~24h,再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm,置4℃冰箱保存。保存时间可达3~6个月。
(二)干燥保存法
原理是将---体内的水分蒸发掉,使其处于休眠和代谢停滞状态,从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存,可保存数年至十几年。
(三)冷冻干燥保存法
本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素(低温、干燥和缺氧等),是目前有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高,变---小等优点,保存期一般3~5年,有的可长达10年以上。
(四)脱脂牛奶保存法
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分离(separation)就是将一个混杂着各种微生物的样品通过分离技术区分开,并按照实际要求和菌株的特性采取迅速、准确、有效的方法对他们进行分离、筛选,进而得到所需微生物的过程。菌株分离、筛选(screening)虽为两个环节,但却不能绝然分开,因为分离中的一些措施本身就具有筛选作用。工业微生物产生菌的筛选一般包括两大部分:一是从自然界分离所需要的菌株,二是把分离到的菌株进一步纯化并进行代谢产物鉴别。 ? {cfrb. 在实验工作中,为使筛选达到---的效果,低温生物菌种,总的说来可从以下几个途径进行收集和筛选: 4jis﹨w}%l3
(1)向菌种保藏机构索取有关的菌株,低温生物菌种价格,从中筛选所需菌株。 ^ 5u}
(2)由自然界采集样品,如土壤、水、动植物体等,从中进行分离筛选。 o|%>;
(3)从一些发酵制品中分离目的菌株,低温生物菌种,如从酱油中分离蛋白酶产生菌,从酒醪中分离淀粉酶或糖化酶的产生菌等。该类发酵制品经过长期的自然选择,具有悠久的历史,从这些传统产品中容易筛选到理想的菌株。 r n$_(%m_n
菌株的分离和筛选一般可分为采样、富集、分离、产物鉴别几个步骤。 8*4x%a=o f
含微生物样品的采集 q?7u itz
自然界含菌样品极其丰富,土壤、水、空气、枯枝烂叶、植物病株、烂水果等都含有众多微生物,种类数量十分---。但总体来讲土壤样品的含菌量很多。 g+^h z4jg
菌种的复壮(rejuvenation):使衰的菌种恢复原来优良性状。
狭义的复壮是指在菌种已发生衰的情况下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰的群体中找出未衰的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施;
广义的复壮是指在菌种的生产性能未衰前就有意识的经常、进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种。
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